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跑Native gel蛋白不稳定,很难进孔,大家有什么好解决的方法

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彩蛋

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发表于 2018-1-28 05:34:20 | 显示全部楼层 |阅读模式

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跑Native gel蛋白不稳定,很难进孔,大家有什么好解决的方法吗?
比如换running buffer种类?加盐?还是其他的。。。。感激。。。
[发帖际遇]: choice 一个月就解出了一个蛋白质结构,大家共同奖励其 7 贡献,并表示“哎,不明觉厉啊!”. 幸运榜 / 衰神榜
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黄金蛋

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发表于 2018-1-29 17:27:59 | 显示全部楼层
我认为蛋白不进孔,是因为蛋白在现在的buffer内带负电不足,可能跟稳定性关系不大。建议改变Buffer pH值。
[发帖际遇]: 荷叶小露 为实验室解除了一次火灾隐患,蛋白质科学网奖励其 5 贡献,并表示“安全第一,实验第二啊”. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 2018-1-30 18:58:55 | 显示全部楼层
你蛋白多大?你跑的多大浓度的Native 胶?我以前自己配的也没遇到你说的情况,跑过200kD-2MD的。实在不行的话,买个Life的Native胶,非常好用,我以前都自己配,现在都用买的。
[发帖际遇]: admin 查阅资料很仔细,蛋白质科学网奖励其 7 贡献. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 2018-1-31 01:37:17 | 显示全部楼层
样品loading buffer里加高于胶浓度的甘油
[发帖际遇]: Spring 做实验很认真,蛋白质科学网奖励其 10 贡献. 幸运榜 / 衰神榜
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