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PCR能P出来但是条带非常弱

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水蛋

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发表于 2017-12-15 02:03:35 | 显示全部楼层 |阅读模式

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如题,PCR能P出来但是条带非常弱,在无法换酶的情况下,有哪些方面可以改进?非常感谢!
[发帖际遇]: 一个袋子砸在了 aspo 头上,aspo 赚了 2 蛋蛋. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 2017-12-15 08:28:47 | 显示全部楼层
第一次PCR产物对的话,拿它做模板做二次PCR
[发帖际遇]: jhtjs2015做科研想象力十足,蛋白质科学网奖励7 贡献,采访TA时,TA说”天才就是我这样的,1%的努力,加上99%的灵感“. 幸运榜 / 衰神榜
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 楼主| 发表于 2017-12-16 05:18:18 | 显示全部楼层
jhtjs2015 发表于 2017-12-15 08:28
第一次PCR产物对的话,拿它做模板做二次PCR

试过,然后非常弥散。。。不知道原因
[发帖际遇]: 楼主很高兴,赏赐 aspo4 贡献. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 2017-12-17 13:27:45 | 显示全部楼层
提高下annealing 温度试试
[发帖际遇]: jhtjs2015上课不认真听讲,还流口水,被有关部门扣 3 蛋蛋. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 2018-1-1 17:46:13 | 显示全部楼层
还可以换换PCR的酶,有Phusion酶有些弥散的,P出来就不会弥散,不过能看到目的条带,片段不是太大的话,应该可以连进去的
[发帖际遇]: clear 为实验室解除了一次火灾隐患,蛋白质科学网奖励其 10 贡献,并表示“安全第一,实验第二啊”. 幸运榜 / 衰神榜
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