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复合物纯化不出来

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银蛋

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发表于 2017-12-7 10:35:25 | 显示全部楼层 |阅读模式

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复合物有多个亚基,paper上是能组装在一起,为什么我无法组装成全复合物?有哪些高人给些点子,谢谢
[发帖际遇]: 蛋蛋上课不认真听讲,还流口水,被有关部门扣 3 蛋蛋. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 2017-12-8 08:49:53 | 显示全部楼层
每个亚基是单独表达的吗?可以直接在表达的时候就一起,这样容易在开始就形成复合物
[发帖际遇]: jhtjs2015最近心情不好,蛋白质科学网代表祖国发来慰问金10 贡献,并带来主席的话“忘记昨天,每一个今天都是新的起跑线”. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 2017-12-8 19:55:02 | 显示全部楼层
我觉得可能原因是:1,可能文章里method部分可能写得不是很完整清晰,你得自己摸索自己合适的条件,如buffer组分;2,你的纯化手艺没到家,许多细节不够讲究;
[发帖际遇]: muheifeng 发帖时在路边捡到 1 蛋蛋,偷偷放进了口袋. 幸运榜 / 衰神榜
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 楼主| 发表于 2017-12-8 23:33:03 | 显示全部楼层
jhtjs2015 发表于 2017-12-8 08:49
每个亚基是单独表达的吗?可以直接在表达的时候就一起,这样容易在开始就形成复合物 ...

是共表达呀,跟带tag的亚基有关吗
[发帖际遇]: 蛋蛋 很爱好问问题,不错,蛋白质科学网打赏其 8 贡献. 幸运榜 / 衰神榜
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 楼主| 发表于 2017-12-8 23:34:45 | 显示全部楼层
muheifeng 发表于 2017-12-8 19:55
我觉得可能原因是:1,可能文章里method部分可能写得不是很完整清晰,你得自己摸索自己合适的条件,如buffe ...

多谢
可能我要多仔细琢磨琢磨
有经验可以一起分享
[发帖际遇]: 蛋蛋 非常用功读书,蛋白质科学网代表主席奖励其 5 贡献,并表示“为中华崛起而读书”. 幸运榜 / 衰神榜
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发表于 7 天前 | 显示全部楼层
蛋蛋 发表于 2017-12-8 23:34
多谢
可能我要多仔细琢磨琢磨
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paper里的method很多不是实际使用条件。你自己最好多试试,特别是盐浓度。
[发帖际遇]: jhtjs2015 非常用功读书,蛋白质科学网代表主席奖励其 4 贡献,并表示“为中华崛起而读书”. 幸运榜 / 衰神榜
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 楼主| 发表于 6 天前 | 显示全部楼层
jhtjs2015 发表于 2017-12-9 16:05
paper里的method很多不是实际使用条件。你自己最好多试试,特别是盐浓度。
...

是的  很坑爹
很多paper都会有所保留
[发帖际遇]: 蛋蛋实验记录写的一丝不苟,蛋白质科学网奖励8 贡献,并带来爱迪生的话“良好的实验记录,是灵感的来源”. 幸运榜 / 衰神榜
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